A20鼠B细胞淋巴瘤的皮下和全身临床前建模

作者:

Sheri Barnes博士 | 科研总监

日期:

2018年11月

淋巴瘤代表一系列从惰性到侵袭性的淋巴样细胞恶性肿瘤。B细胞源性淋巴瘤(特别是非霍奇金淋巴瘤(NHL))最为普遍,但是这种疾病也可以起源自T细胞。到2018年,美国估计将有74,680例新增NHL病例,以及19,910例死亡病例。尽管NHL的五年生存率相对较高,为71%[1],但复发很常见,因此,不断研发改进的淋巴瘤治疗方法对于这些患者的长期生存至关重要。

研究人员使用临床前小鼠淋巴瘤模型来研究常规化疗或放疗和免疫调节剂的新型联合治疗方案。为支持这些研究,科文斯研发出鼠B细胞淋巴瘤模型 A20。 A20源自衰老的Balb/c小鼠自发形成的网状细胞肉瘤。[2] A20肿瘤据报告称可表达PD-L1,[3]这与我们的RNAseq谱保持一致(数据未显示),并且与几种人类淋巴瘤亚型一致,[4]这使其在免疫疗法药物研发中具有吸引力。

在某期2017年模型聚焦中,我们介绍了初始生长数据以及皮下植入后不久开始的治疗反应。 2018年,我们继续努力扩展此模型的表征。本文中,我们介绍了已建立的皮下A20肿瘤的初始抗肿瘤反应数据,以及采用系统荧光素酶的A20模型的生长动力学,并通过生物发光成像监测了肿瘤的进展(BLI)。

用免疫治疗剂在体内治疗A20对早期疾病极为有效,可产生多种完全反应。但是,正如预期的那样,一旦肿瘤形成就开始治疗会导致更为有限的反应。图1说明了对照肿瘤以及使用抗mPD-1或抗mPD-L1单药治疗或与SARRP (XStrahl)局部放射治疗联合治疗的肿瘤的个体(AF)生长。 联合疗法产生了比加成抗肿瘤反应更好的结果,表明一旦建立肿瘤,就可以在A20模型中轻松评估这些方案。此外,抗mGITR和抗mCD137对已建立的A20肿瘤可产生低到中等的疗效,因此可在广泛的动态范围内评估这些抗体和研究药物联合使用的改善情况(图2 A-C)。

图1:已建立的A20肿瘤对治疗的反应; CR =完全反应,TFS = 无肿瘤的幸存者
图1:已建立的A20肿瘤对治疗的反应; CR =完全反应,TFS = 无肿瘤的幸存者

图2:已建立的A20肿瘤对共刺激分子的反应; CR =完全反应,TFS = 无肿瘤的幸存者
图2:已建立的A20肿瘤对共刺激分子的反应; CR =完全反应,TFS = 无肿瘤的幸存者

 

为了进一步提高A20淋巴瘤模型的效用,我们使用采用萤光素酶的A20细胞系监测全身性疾病的肿瘤进展。模型的中位倍增时间为2.7天,治疗时间约为三周。

图3:个体A20-Luc生长动力学和存活率
图3:个体A20-Luc生长动力学和存活率

 

图3显示了由BLI(A)决定的个体肿瘤进展和表明良好生长动力学的总体存活率(B),图4显示了随时间推移的代表性BLI成像。尸检时,记录到肝脏损伤的发生率为100%,后肢麻痹和/或其他器官(即脾脏、卵巢、胰腺)病变的发生率为70%。腹胀是在第30-32天之间出现的常见临床体征,在图3和4中与出现较强BLI信号的时机密切相关。正在使用该系统模型进行一项后续研究,以研究对检查点阻断和共刺激分子的反应。

 

图4:系统性A20-Luc - 随时间推移的代表性BLI图像
图4:系统性A20-Luc - 随时间推移的代表性BLI图像

 

A20模型提供了可靠的临床前手段以通过皮下和全身性方法研究B细胞淋巴瘤。请联系科文斯,咨询我们的科学家,了解A20或我们的其他同系模型可如何用于您的下一次免疫肿瘤学研究。

[1]Howlader N、Noone AM、Krapcho M, Miller D、Bishop K、Kosary CL、Yu M、Ruhl J、Tatalovich Z、Mariotto A、Lewis DR、Chen HS、Feuer EJ、Cronin KA (eds)。SEER Cancer Statistics Review,1975-2014,国家癌症研究所。Bethesda,医学博士, https://seer.cancer.gov/csr/1975_2014/,基于2016年11月提交的SEER数据,发布于SEER网站,2017年4月。

[2] Kim KJ、Kanellopoulos Langevin C、Merwin RM、Sachs DH、Asofsky R (1979) 具有B细胞特性的BALB/c淋巴瘤细胞系的建立和表征。《免疫学杂志》,122(2): 549-554。

[3] Sagiv-Barfi I、Kohrt HEK、Czerwinski DK、Ng PP、Chang BY、Levy L (2015) BTK和ITK的抑制剂依鲁替尼可增强检查点阻断的治疗性抗肿瘤免疫力。PNAS, 112(9): E966-E972。

[4] Gatalica Z、Bilalovic N、Vranic S、Arguello D、Reddy S和Ghosh N (2015) PD-L1和PD1在淋巴瘤中的表达。血液,126; 3899。


注意:研究是根据适用的动物福利法规在AAALAC认可的研究中心进行的